ในการสํารวจโลกของกล้องจุลินทรีย์ กล้องจุลินทรีย์ยังคงเป็นหนึ่งในเครื่องมือที่มีพลังมากที่สุดในอาวุธของนักวิจัยอุปกรณ์ เหล่า นี้ ไม่ เพียง เปิด ให้ เห็น โครงสร้าง ที่ ไม่ เห็น ด้วย ตาเปล่า เท่า นั้น แต่ ยัง เปิด ให้ เห็น กลไก ที่ ซ่อน อยู่ ภาย ใน โครงสร้างในระหว่างเทคนิคกล้องจุลินทรีย์ต่าง ๆ ล้อใหญ่และกล้องจุลินทรีย์คอนโฟคอลโดดเด่นเป็นสองวิธีการที่ใช้กันมากที่สุด แต่ละวิธีมีหลักการและการใช้งานในการถ่ายภาพที่แตกต่างกันการ เลือก เทคนิค มิกรอสโกปี ที่ เหมาะสม เป็น เรื่อง สําคัญ สําหรับ การ สร้าง ข้อมูล การทดลอง ที่ มี คุณภาพ ดี.
ลองจินตนาการว่าพยายามถ่ายภาพสวนหลังมีฝนตก กล้องธรรมดาจะถ่ายฝนตกลง ดอกไม้และใบไม้พร้อมกันเพียงบางส่วนของฉากจะปรากฏชัด ๆ ในขณะที่ส่วนอื่น ๆ ยังคงไม่ชัดเจน. กล่องจุลินทรีย์แว๊ดฟิลด์ทํางานคล้ายกัน - มันส่องแสงตัวอย่างทั้งหมดพร้อมกันและรวบรวมแสงที่ออกออกมาทั้งหมดเพื่อสร้างภาพสองมิติการถ่ายภาพพร้อมกันของโครงสร้างที่มีความลึกที่แตกต่างกัน ทําให้ภาพชัดเจน.
ในส่วนที่ตรงกันข้าม มิกรอสโกปีคอนโฟกัสทํางานเหมือนนักปั้นความแม่นยํา มันใช้แสงเลเซอร์ในการสแกนตัวอย่างจุดต่อจุดรักษาภาพระนาบแกร่งที่คมชัดเท่านั้นผ่านการสแกนลําดับของหลายระนาบ มิกรอสโกปีคอนโฟคัล สร้างตัวแทนสามมิติของตัวอย่าง ทําให้สามารถสังเกตรายละเอียดในกล้องจุลินทรีย์ได้ชัดเจนขึ้น
ในฐานะที่เป็นชนิดของกล้องจุลินทรีย์ที่พื้นฐานและทั่วไปที่สุด กล้องจุลินทรีย์สนามกว้างทํางานผ่านหลักการที่ตรงไปตรงมามันใช้แหล่งแสงแบบเดียวกัน (มักเป็นฮาโลเจนหรือ LED) เพื่อส่องแสงตัวอย่างทั้งหมดเนื่องจากระนาบตัวอย่างทั้งหมดได้รับแสงพร้อมกัน, ไมโครสโกปีแฟลด์กว้างสามารถทําภาพได้อย่างรวดเร็วทําให้มันมีคุณค่าพิเศษสําหรับการถ่ายภาพเซลล์มีชีวิต, การศึกษาระยะยาว และการใช้งานการกรองที่มีความสามารถสูง
เทคนิคที่ก้าวหน้านี้ใช้การสแกนเลเซอร์และการกรองรูสกัด เพื่อจับภาพได้อย่างคัดเลือกจากระดับจุดเฉพาะเจาะจง ทําให้สามารถมองเห็นภาพสามมิติความละเอียดสูงได้ขณะที่หลักการปฏิบัติงานของมันมีความซับซ้อนกว่า, ผลการปรับปรุงคุณภาพภาพของภาพเป็นอย่างมาก.
| ลักษณะ | มิกรอสโกปีแวิดฟิลด์ | มิกรอสโกปีคอนโฟคัล |
|---|---|---|
| หลักการการถ่ายภาพ | การส่องแสงแบบเต็มตัวอย่าง | การสแกนจุดด้วยการกรองหลุมเข็ม |
| การแก้ไข | ล่าง | สูงกว่า |
| ความลึกของสนาม | ขนาดใหญ่ | ขนาดเล็ก |
| ความสามารถ 3 มิติ | เพียงการฉาย 2 มิติเท่านั้น | การสร้างใหม่แบบ 3 มิติเต็ม |
| ความเร็วในการซื้อ | เร็วๆ | นิ่งๆ |
| ความซับซ้อนทางการดําเนินงาน | ง่ายๆ | ระดับสูง |
| ค่าใช้จ่าย | ต่ํา | สูง |
| การใช้งานทั่วไป | การนับเซลล์ การสังเกตต่อเนื้อเยื่อ การถ่ายภาพเซลล์มีชีวิต การตรวจฉลากที่มีความสามารถสูง | การศึกษาภายใต้เซลล์ การวิเคราะห์เนื้อเยื่อ 3 มิติ อินมูโนฟลูเรเซนซ์ การวิจัยด้านวิทยาศาสตร์ประสาท |
เมื่อ เลือก ในระหว่าง เทคนิค มิกรอสโคปี้ เหล่า นี้ พิจารณา ปัจจัย สําคัญ เหล่า นี้:
เทคนิคกล้องจุลินทรีย์ทั้งสองมีข้อดีและข้อจํากัดที่แตกต่างกันออกไป การเลือกที่ดีที่สุดต้องประเมินความต้องการการวิจัย, คุณสมบัติตัวอย่าง, ปรามาตรการทดลองและทรัพยากรที่มีการวิเคราะห์เปรียบเทียบนี้มีเป้าหมายที่จะเพิ่มความเข้าใจของนักวิจัยเกี่ยวกับเครื่องมือพื้นฐานเหล่านี้สําหรับการสํารวจทางกล้องจุลินทรีย์
